自动生化分析仪的光学测定原理解析。若把某两种颜色的光按照一定的比例混合,能够得到白色光的话,则这两种颜 色的光就叫做互补色。
1. 由于有色物质对光的吸收具有选择性,因此,在进行比 色测定时,只能用光波中能被有色溶液吸收的那部分光 线,即应该用单色光进行比色测定。
2. 至于不被有色溶液吸收的光线。则应设法在未透过有色 溶液之前或之后将其消除掉。
3. 滤光片就起这个作用。根据前面所叙述的理由可知,选 择滤光片的原则应是:滤光片的颜色应与待测溶液的颜色 为互补色。
朗伯-比尔定律 当一束平行单色光照射到均匀、非散射的溶液时, 光的一部分被吸收,一部分透过溶液,一部分被比色皿 的表面所反射。设入射光的强度为Io,吸收光的强度Ia ,反射光的强度为Ir,透过光的强度为It。则它们之间 有如下关系: Io= Ia + Ir + It
在实际比色分析时,所用的比色皿都是同质料、同 规格的,因此反射光的强度为一定值,不会引起误差, 即反射光的影响可以不加考虑。这样,上式可简化为: I o= I a + I t 当入射光的强度一定时,被吸收的光的强度越大, 透过光的强度就越小。这就是说,光的减弱仅仅与有色 溶液对光的吸收有关。 溶液的浓度越大、透过的液层越厚、入射的光线越 强,则对光线的吸收越多。
如果入射光的强度不变,则光的吸收仅与液层厚度 及溶液的浓度有关。它们之间的关系可以用下式表示: A=K×C×L 1.式中,A为吸光度;K为吸(消)光系数;C为溶液的浓度 ;L为液层厚度。 2.此公式说明:在入射光一定时,溶液的吸光度与溶液的 浓度及液层厚度成正比。 3.此式就是光的吸收定律的数学表达式,又称朗伯-比尔 定律。这一定律是比色分析和其他吸收光谱分析的理论 基础。
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